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程序降溫是低溫保存、冷凍干燥過程中的一個(gè)關(guān)鍵步驟

更新時(shí)間:2025-10-28點(diǎn)擊次數(shù):355

低溫一般是指0℃左右,深低溫一般指低于-80℃以下,在低溫環(huán)境中,生物體的新陳代謝會(huì)隨著溫度的降低而延緩。在0℃以上時(shí),這種延緩是可逆的,隨著溫度升高,新陳代謝還回逐步恢復(fù),但降至0℃以下時(shí),這種延緩會(huì)受到不可逆的損傷。因?yàn)樾玛惔x一般發(fā)生在水溶液或和水溶液之上進(jìn)行,而冰點(diǎn)以下的水會(huì)形成硬度較高的冰晶,并且會(huì)使細(xì)胞內(nèi)的水分丟失而形成細(xì)胞脫水。

所以不同的細(xì)胞要求利用不同的降溫程序,一些復(fù)雜的細(xì)胞還需要多段降溫。降溫方法多樣,例如利用冰箱進(jìn)行兩步法降溫,和利用液氮容器內(nèi)氣象區(qū)的溫度梯度手控降溫。

在設(shè)計(jì)和選用降溫儀時(shí)需要全面考慮到產(chǎn)品需求,例如數(shù)量、形狀等,同時(shí)需要考慮降溫儀的降溫速率、溫控范圍等,另外還要考慮到經(jīng)濟(jì)性和實(shí)用性,綜合評(píng)價(jià)下選用合適的方案。

(1)工作溫度范圍:一般情況下降溫儀的溫控范圍是室溫至-60℃,最適溫度則根據(jù)實(shí)際工作需要決定。

(2)溫控速率:經(jīng)過數(shù)十年的反復(fù)研究,學(xué)者們發(fā)現(xiàn)越低的降溫速率越能實(shí)現(xiàn)對(duì)于復(fù)雜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞降溫需求,而所謂的“超慢速冷卻"則需要降溫儀能夠達(dá)到0.001℃/min的速度。另外個(gè)別需要急速冷凍的工作需要,則可以直接選擇液氮冷凍的方式進(jìn)行。

(3)控制精度:降溫過程中的控制精度包括兩個(gè)方面:降溫速率的精度控制和溫度值的精度控制。實(shí)踐中認(rèn)為誤差在5%之內(nèi)是可以被接受的。嚴(yán)格來說,一般控制在±0.2℃的精度控制內(nèi)是可以被允許的。

(4)冷源的選擇:在實(shí)際工作中,一般情況下使用價(jià)格較低的固態(tài)二氧化碳和液氮用來作為冷源。當(dāng)華點(diǎn)高于-78℃時(shí),一般選用固態(tài)二氧化碳,而需要更低溫度時(shí)則選用液氮,目前大多數(shù)降溫儀選用的冷源是液氮。

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